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MicroRNA-193a通過靶向WT1抑制肝細胞癌發生的機制研究

劉亞琪  鄭承紅  
【摘要】:目的:通過檢測miR-193a在肝細胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)組織中以及其對肝癌細胞的影響探討其在HCC中的機制。方法:肝癌組織和相鄰非癌的正常組織取自武漢市中醫醫院的75名肝癌患者,采用定量實時聚合酶鏈反應(qRT-PCR)法比較miR-193a和Wilms'腫瘤1基因(WT1)在肝癌組織和相鄰非癌的正常組織的表達水平。探討肝癌組織中miR-193a的表達與腫瘤分期、腫瘤是否轉移、分化程度的相關性。檢測肝癌細胞系MHCC97H,HCCLM3,Huh7和人正常肝細胞系LO2中miR-193a表達。此外,過表達和抑制miR-193a后通過細胞計數CCK-8法對HCC細胞增殖進行檢測。通過異種移植物腫瘤形成試驗觀察抑制miR-193a是否加速HCC的腫瘤生長。通過雙重熒光素酶測定法證實WT1是否為miR-193a的靶點基因。結果:相對于非癌組織,肝癌組織中miR-193a相對于表達顯著降低(P0.01),WT1基因表達顯著升高,同時miR-193a的表達在正常肝細胞系中的表達顯著低于肝癌細胞系(P0.05~P0.01)。肝癌患者TNM分期(P=0.004)以及淋巴結轉移程度(P=0.013)在miR-193a低表達組患者相對于高于miR-193a高表達組更為嚴重。生存分析表明低表達miR-193a的肝癌患者的預后較差。此外,發現過表達miR-193a抑制HCC細胞增殖,而抑制miR-193a表達促進了HCC增殖。在體外miR-193a過表達抑制了HCC的腫瘤生長。熒光素酶試驗證實WT1是miR-193a的靶點基因。結論:miR-193a可通過靶向WT1抑制HCC發生。
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